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越來越多的科研人員用預制膠代替手動灌膠

首先來跟大家普及一下什么叫預制膠。
預制膠,顧名思義,就是廠家預先制備好的凝膠。預制膠的好處在于,打開包裝就能用,點上樣本就能跑,可以大大加快了實驗進程,同時也讓您遠離繁瑣的操作和有毒的試劑,不再為漏膠等問題而煩惱。
 
預制膠給很多科研人員帶來更佳的體驗感受,原因在于:預制膠的成分更均一,批間差異小,最終的數據將體現出更高的一致性和重復性;同時,與手動灌膠相比,預制膠分離的蛋白條帶更加銳利,分辨率也更高,能夠獲得更漂亮的電泳結果。預制膠還有一個優勢在于,保質期長。自制的凝膠大約只能保存一周,而預制膠能保存數個月,甚至一年。
 
如今,越來越多的研究人員開始使用非變性凝膠。與變性凝膠相比,不含SDS的非變性凝膠體系在分離蛋白的同時,能夠保留其天然的結構,從而可用于蛋白質之間相互作用的研究,以及蛋白質復合物的分離和分析。
 
NativePAGE Bis-Tris非變性蛋白預制膠它是基于Blue-Native PAGE的原理,讓考馬斯亮藍G-250附著在蛋白上使其帶有負電荷,同時保持蛋白質的天然狀態,不會使其變性。在上樣前將G-250添加于含有非離子型表面活性劑的蛋白樣本中,可以讓蛋白帶上負電荷;同時G-250也會加于陰極緩沖液中為凝膠提供持續的G-250供給,傳統的非變性電泳大多采用Tris-甘氨酸系統,其工作pH較高(9.3-9.5),會對在高pH條件下敏感的蛋白質帶來不利影響,相比之下,NativePAGE Bis-Tris預制膠的工作pH接近中性(7.5-7.7),有助于保持蛋白質的天然結構和對高pH值敏感的蛋白質的活性。同時,由于傳統的Tris-甘氨酸非變性電泳系統主要利用工作pH高于蛋白質等電點而使其帶上負電荷后進行電泳,因此不適用于等電點高于電泳工作pH的蛋白質。而NativePAGE利用考馬斯亮藍G-250使蛋白質在非變性條件下帶負電,并在近中性工作pH下進行電泳,因此無需再考慮蛋白的等電點造成的限制。
 
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