生物制品中半硫代化合物IPTG的殘留量測(cè)定方法
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷（以下簡(jiǎn)稱為IPTG）是一種半硫代的化合物，是異乳糖的結(jié)構(gòu)類似物，化學(xué)式為C9H18O5S,。現(xiàn)有技術(shù)中IPTG作為一種分子生物學(xué)試劑，可用來(lái)誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)，或作為誘導(dǎo)劑促進(jìn)目的蛋白的大量表達(dá)，但需要注意的是IPTG價(jià)格昂貴，對(duì)人體具有潛在的毒性，當(dāng)利用誘導(dǎo)表達(dá)應(yīng)用于重組藥物時(shí)，需要對(duì)IPTG含量測(cè)進(jìn)行檢測(cè)。
目前對(duì)于異丙基-β-d-硫代半乳糖苷（IPTG）的檢測(cè)方法包括紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器檢測(cè)、衍生化高效液相檢測(cè)、高分辨液相、離子色譜檢測(cè)、液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)等方法。常用的液相色譜檢測(cè)方法選擇性較差，可能存在衍生不完全的可能，因此需要開(kāi)發(fā)一種生物制品中IPTG的檢測(cè)方法。
實(shí)驗(yàn)室查閱文獻(xiàn)資料，嘗試使用液質(zhì)聯(lián)用對(duì)IPTG含量進(jìn)行檢測(cè)。移取生物大分子，置于離心管中，加入乙腈溶液稀釋液，充分渦旋混勻使蛋白沉淀析出，離心后取上清，得到供試品溶液，將稀釋劑乙腈、靈敏度溶液、對(duì)照品溶液、供試品溶液分別注入液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，記錄色譜圖。
目前對(duì)于異丙基-β-d-硫代半乳糖苷（IPTG）的檢測(cè)方法包括紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器檢測(cè)、衍生化高效液相檢測(cè)、高分辨液相、離子色譜檢測(cè)、液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)等方法。常用的液相色譜檢測(cè)方法選擇性較差，可能存在衍生不完全的可能，因此需要開(kāi)發(fā)一種生物制品中IPTG的檢測(cè)方法。
試驗(yàn)結(jié)果表明：IPTG的線性回歸方程為相關(guān)系數(shù)r為0.999，準(zhǔn)確度，精密度、靈敏度、重復(fù)性、穩(wěn)定性等符合企業(yè)可接受標(biāo)準(zhǔn)。可以準(zhǔn)確定量生物大分子中的IPTG殘留量,有效評(píng)估IPTG殘留量對(duì)產(chǎn)品的影響。同時(shí)樣品制備簡(jiǎn)便，測(cè)試時(shí)間短。經(jīng)過(guò)系統(tǒng)驗(yàn)證為生物大分子藥物（包括重組蛋白、抗體等）的IPTG含量，提供了一種新的檢測(cè)手段。
生物藥物制備過(guò)程中可能引入的雜質(zhì)、輔料和介質(zhì)等成分，如果留存在最終產(chǎn)品中，可能引發(fā)不良反應(yīng)或降低療效。對(duì)生物藥工藝殘留進(jìn)行檢測(cè)是一項(xiàng)重要的質(zhì)量控制措施，可以確保藥物的純度和質(zhì)量，微源檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室可利用多種大型檢測(cè)儀器對(duì)各種生物藥工藝殘留進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)不同樣品情況針對(duì)性的選擇檢測(cè)方法，監(jiān)測(cè)含量變化。
生物藥工藝殘留項(xiàng)目目前檢測(cè)內(nèi)容包含：司盤(pán)60、泊洛沙姆F68、曲拉通等表面活性劑；慶大霉素、卡那霉素等抗生素；聚乙二醇PEG、乙二胺四乙酸EDTA、三羥甲基氨基甲烷T(mén)RIS等工藝增強(qiáng)劑及催化劑.
湖南省長(zhǎng)沙市高新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)文軒路27號(hào)麓谷鈺園C3棟1103室
13308475853 向經(jīng)理
3002732518@qq.com
?_proc.jpg)
客服 