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什么是牛血清白蛋白?有什么作用?

3/31/2021 1:53:07 PM
一、什么是牛血清白蛋白

牛血清白蛋白(BSA),CAS號9048-46-8,是牛血清中的一種球蛋白,包含607個氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。

二、牛血清白蛋白的作用

牛血清白蛋白(BSA)一般做為穩定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中,因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保護”或“載體”作用,不少酶類添加BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可實現重復切割。在37℃,酶切反應超過1h時,BSA可以使酶更加穩定,因為在不含BSA的反應緩沖液中,許多限制性內切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質。

三、牛血清白蛋白的分級及選擇(牛血清白蛋白等級低到高)

1.牛血清白蛋白(等級最低的BSA),這個是普通意義上的BSA,只要主要成分是BSA的產品都可以成為牛血清白蛋白,所以他也涵蓋了其他等級的BSA,所以客戶要注意其純度(一般是工業生產用)。

2.牛血清白蛋白第五組分,這個是生物技術級的產品,適用范圍是最廣的,有些廠家的BSAV脂肪酸和內毒素很低,可直接用于細胞培養,純度高甚至可以用于任何相關實驗(Elisa實驗,WB實驗)。

3.牛血清白蛋白(無必須脂肪酸),脂肪酸含量極低,脂肪酸含量≤0.002%(w/w),或在1%BSA溶液中脂肪酸濃度<2μmol/L(可用于測定培養的組織細胞釋放的游離脂肪酸濃度等)。

4.牛血清白蛋白(無蛋白酶),或者稱為無Protease牛血清白蛋白,或者稱為ProteaseFreeBSA,產品不含有DNAse酶、蛋白酶以及IgG(用于放射免疫、酶聯免疫以及作為稀釋劑或者封閉劑等)。

5.牛血清白蛋白(細胞培養級),純度98%即可,但是要求脂肪酸含量和內毒素含量極低(細胞培養及細胞培養相關的實驗等)。

6.牛血清白蛋白,高純度,純度99%以上(金標級,制作金標抗體等)。

7.交聯牛血清白蛋白:冷凍干燥粉末,含單體(66000)、二聚體(132000)、三聚體(198000)、四聚體(264000)等(測定未知蛋白質的分子量,也可用于生化教學實驗,用以摸索電泳條件、檢定電泳結果等)。
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